400-9669-163 |
搜索
|
博瑞科生物鸭病毒性肝炎筛选与回归试验
博瑞科生物
鸭病毒性肝炎筛选与回归试验
鸭病毒性肝炎病毒筛选 1.1 分离病毒 从不同地区发病鸭场内解剖感染病例，获得病毒载量较高的器官--肝脏，经研磨过滤后接种于10日龄鸭胚，鸭胚出现死亡后收获尿囊液和胚体，经研磨离心过滤后再次接种到10日龄鸭胚，重复以上过程，直至该毒株可使鸭胚稳定死亡。 1.2 纯净性检测 将筛选到的病毒进行细菌、真菌、支原体及其他常见病毒检测。 1.3 鸭胚培养与毒价测定 将1.1获得的胚毒用于检测病毒毒价，如表1所示。根据所得病毒毒价，将1型毒株分离株1、分离株2、分离株4和3型毒株分离株6、分离株8接种到4日龄雏鸭进行动物回归实验。鸭胚半数致死量（ELD50）用Reed-Muench法计算。
1.4 动物回归实验
将5个分离株回归4日龄雏鸭，各10只，每天记录死亡情况和剖检观察肝脏病变，结果见表2，将分离株2、分离株4和分离株6作为疫苗待选毒株。
雏鸭攻毒保护实验
1、2日龄健康未免疫雏鸭40只，由山东博瑞科生物技术有限责任公司研发部提供。
2、鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体（甘维康），由山东博瑞科生物技术有限责任公司质控部提供。
3、鸭肝炎病毒（1+3）型病毒液，0.2ml含100ID50 ，由山东博瑞科生物技术有限责任公司质控部提供。
雏鸭攻毒保护率检验方法：
把40只2日龄雏鸭，分为1、2、3、4组，每组10只。
1组为健康对照组，不注射任何药品，单独隔离饲养；2、3组为蛋黄抗体免疫组，每组分别肌肉注射0.5羽份、1羽份卵黄抗体；4组为攻毒对照组，每只注射生理盐水0.5ml，隔离饲养。
隔24小时左右，2、3、4组分别肌肉注射鸭肝炎病毒1+3型病毒液0.2ml，继续隔离饲养，观察10天，记录死亡鸭子只数。
雏鸭攻毒保护率检验法按暂行规程要求蛋黄抗体组保护率80%以上 ，对照组死亡数符合要求 ，抗体效价合格 。以上试验符合试验要求，两种免疫剂量的雏鸭攻毒保护率分别为 90%和90%。
